La lactato deshidrogenasa es una enzima, distribuida por todo el organismo humano. Las mayores concentraciones de LDH se encuentran en el hígado, corazón, riñón, músculo esquelético y eritrocitos. El nivel de LDH en suero está elevado en pacientes con enfermedades del hígado, infartos de miocardio, alteraciones renales, distrofias musculares y anemias.
Principio del método
La LDH cataliza la reducción del piruvato por el NADH. La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio determinado fotométricamente es proporcional a la concentración catalítica de LDH en a muestra.
Materiales
- RT = Disolver un comprimido de R2 en un vial de R1
- Cubetas de espectrofotometría
- Pietas automáticas
- Pinzas
- Suero
- Tubo
- Gradillas
- Espectrofotómetro
Procedimiento
1. Ajustar el espectrofómetro según los parámetros de esta medida:
- Longitud de onda: 340 nm
- Factor: 9690
- Tiempo de incubación: 60 segundos
- Temperatura de trabajo: 37ºC
- Tiempo de espera entre lecturas: 60 segundos
- Nº de intervalos: 3
2. En el vial con RT añadir 50 microlitros de suero.
3. Mezclar e introducir en el espectrofotómetro, previamente programado y ajustado a cero frente a agua destilada.
Resultados
(NOTA: Para la medida hemos utilizado dos aparatos diferentes)
Biosystem BTS - 310:
- Absorbancia 1: 1'117 A
- Absorbancia 2: 1'106 A
- Absorbancia 3: 1'094 A
- Absorbancia 4: 1'081 A
- Concentración: 116'6 U/L
Data test - ATOM:
- Absorbancia 1: 1'074 A
- Absorbancia 2: 1'059 A
- Absorbancia 3: 1'043 A
- Absorbancia 4: 1'028 A
- Concentración: 148'5 U/L
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