La creatinina es e resultado de la degradación de la creatina, componente de los músculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células. La producción de creatinina depende de la modificación de la masa muscular. Varía poco y los niveles suelen ser muy estables. Se elimina a través del riñón. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico.
Principio del método
El ensayo de la creatinina está basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito por Jaffé. La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método. La intensidad de color formado es proporcional a la concentración de cratinina en la muestra ensayada.
Materiales
- Tubos de ensayo
- Cubetas de espectrofotómetro
- Pipetas automáticas
- Gradillas
- RT (15 ml R1 + 15 ml R2)
- CREATININE CAL (2 mg/dl)
- Suero
- Espectrofotómetro
Procedimiento
1. Pipetear 1,0 ml de RT en tres tubos.
2. Poner el espectrofotómetro a cero frente al RT a 492 nm.
3. Pipetear 100 microlitros de patrón en un tubo, esperar 30 segundos y medir. Esperar 60 segundos y realizar una segunda medición.
4. Pipetear 100 microlitros de muestra en otro tubo, esperar 30 segundos y medir. Esperar 60 segundos y realizar una segunda medición.
Resultados
Patrón 30": -0,003 A
Patrón 90": 0,039 A
Incremento patrón = 0,039 A - (-0,003 A) = 0,042 A
Muestra 30": 0,114 A
Muestra 90": 0,144 A
Incremento muestra = 0,144 A - 0,114 A = 0,030 A
Concentración creatinina = (0,030 A / 0,042 A) x 2 mg/dl = 1, 43 mg/dl
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